Selective photodynamic effects on cervical adenocarcinoma cells provided by F127 Pluronic®-based micelles modulating hypericin delivery

Abstract Cervical cancer is a leading cause of death among women. The endocervical adenocarcinoma (ECA) represents an aggressive and metastatic type of cancer with no effective treatment options currently available. We evaluated the antitumoral and anti-migratory effects of hypericin (HYP) encapsulated on Pluronic F127 (F127/HYP) photodynamic therapy (PDT) against a human cell line derived from invasive cervical adenocarcinoma (HeLa) compared to a human epithelial cell line (HaCaT). The phototoxicity and cytotoxicity of F127/HYP were evaluated by the following assays: colorimetric assay, MTT, cellular morphological changes by microscopy and long-term cytotoxicity by clonogenic assay. In addition, we performed fluorescence microscopy to analyze cell uptake and subcellular distribution of F127/HYP, cell death pathway and reactive oxygen species (ROS) production. The PDT mechanism was determined with sodium azide and D-mannitol and cell migration by wound-healing assay. The treatment with F127/HYP promoted a phototoxic result in the HeLa cells in a dose-dependent and selective form. Internalization of F127/HYP was observed mainly in the mitochondria, causing cell death by necrosis and ROS production especially by the type II PDT mechanism. Furthermore, F127/HYP reduced the long-term proliferation and migration capacity of HeLa cells. Overall, our results indicate a potentially application of F127/HYP micelles as a novel approach for PDT with HYP delivery to more specifically treat ECA.

Association of human papillomavirus and Chlamydia trachomatis with intraepithelial alterations in cervix samples

The influence of different infectious agents and their association with human papillomavirus (HPV) in cervical carcinogenesis have not been completely elucidated. This study describes the association between cytological changes in cervical epithelium and the detection of the most relevant aetiological agents of sexually transmitted diseases. Samples collected from 169 patients were evaluated by conventional cytology followed by molecular analysis to detect HPV DNA, Chlamydia trachomatis, herpes simplex virus 1 and 2,Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, andTreponema pallidum, besides genotyping for most common high-risk HPV. An association between cytological lesions and different behavioural habits such as smoking and sedentariness was observed. Intraepithelial lesions were also associated with HPV and C. trachomatis detection. An association was also found between both simple and multiple genotype infection and cytological changes. The investigation of HPV and C. trachomatisproved its importance and may be considered in the future for including in screening programs, since these factors are linked to the early diagnosis of patients with precursor lesions of cervical cancer.

Prevalence of Candida albicans and non-albicans isolates from vaginal secretions: comparative evaluation of colonization, vaginal candidiasis and recurrent vaginal candidiasis in diabetic and non-diabetic women / Prevalência de Candida albicans e não albicans isoladas de secreção vaginal: avaliação comparativa entre colonização, candidíase vaginal e candidíase vaginal recorrente em mulheres diabéticas e não diabéticas

CONTEXT AND OBJECTIVE: Vulvovaginal candidiasis (VVC) is caused by abnormal growth of yeast-like fungi on the female genital tract mucosa. Patients with diabetes mellitus (DM) are more susceptible to fungal infections, including those caused by species of Candida. The present study investigated the frequency of total isolation of vaginal Candida spp., and its different clinical profiles - colonization, VVC and recurrent VVC (RVVC) - in women with DM type 2, compared with non-diabetic women. The cure rate using fluconazole treatment was also evaluated. DESIGN AND SETTING: Cross-sectional study conducted in the public healthcare system of Maringá, Paraná, Brazil. METHODS: The study involved 717 women aged 17-74 years, of whom 48 (6.7%) had DM type 2 (mean age: 53.7 years), regardless of signs and symptoms of VVC. The yeasts were isolated and identified using classical phenotypic methods. RESULTS: In the non-diabetic group (controls), total vaginal yeast isolation occurred in 79 (11.8%) women, and in the diabetic group in 9 (18.8%) (P = 0.000). The diabetic group showed more symptomatic (VVC + RVVC = 66.66%) than colonized (33.33%) women, and showed significantly more colonization, VVC and RVVC than seen among the controls. The mean cure rate using fluconazole was 75.0% in the diabetic group and 86.7% in the control group (P = 0.51). CONCLUSION: We found that DM type 2 in Brazilian women was associated with yeast colonization, VVC and RVVC, and similar isolation rates for C. albicans and non-albicans species. Good cure rates were obtained using fluconazole in both groups. .

CONTEXTO E OBJETIVO: Candidíase vulvovaginal (CVV) é causada pelo crescimento anormal de fungos do tipo leveduras na mucosa do trato genital feminino. Pacientes com diabetes mellitus (DM) são mais susceptíveis a infecções fúngicas, incluindo por espécies de Candida. O presente estudo investigou a frequência de isolamento total de Candida spp. vaginal, e diferentes quadros clínicos (CVV e CVV recorrente- CVVR) em mulheres com DM tipo 2 comparadas às não diabéticas. A razão de cura do tratamento com fluconazol também foi avaliada. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal realizado no sistema público de saúde de Maringá, Paraná, Brazil. MÉTODO: O estudo envolveu 717 mulheres de 17-74 anos de idade e, destas, 48 (6,7%) tinham DM 2 (média de 53,7 anos), independentemente de sinais e sintomas de CVV. As leveduras foram isoladas e identificadas por métodos fenotípicos clássicos. RESULTADOS: No grupo de não diabéticas (controle), leveduras vaginais totais foram isoladas em 79 (11,8%) mulheres, e no grupo de diabéticas, em 9 (18,8%) (P = 0,000). O grupo de diabéticas mostrou mais mulheres sintomáticas (CVV + CVVR = 66,66%) do que colonizadas (33.33%), e significativamente mais colonização, CVV e CVVR, que as controle. A razão média de cura com fluconazol foi de 75.0% no grupo diabéticas e 86.7% no controle (P = 0.51). CONCLUSÃO: Nós encontramos que DM 2 em mulheres brasileiras associou-se com colonização vaginal por leveduras, CVV e CVVR, razão similar de isolamento de C. albicans e espécies não albicans. Boa taxa de cura foi obtida com fluconazol em ambos os grupos.

Influência da co-agregação entre candida. albicans e lactobacillus acidophilus na capacidade de adesão destes microrganismos às células epiteliais vaginais humanas (CEVH) / Influence of the co-aggregation between candida. albicans e lactobacillus acidophilus on the adhesion capacity these microorganisms in the human ephitelial vaginal cells (HEVC)

Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência da co-agregação in vitro entre Candida albicans e Lactobacillus acidophilus na capacidade de adesão destes microrganismos às células epiteliais vaginais humanas (CEVH). Foram utilizados um isolado vaginal de C. albicans e uma cepa ATCC de L. acidophilus. Uma suspensão de cada microrganismo isoladamente e do coagregado foram incubados com as CEVH obtidas de uma doadora saudável. Foram feitos esfregaços por cristal violeta e Papanicolaou, e o número de leveduras, lactobacilos ou coagregados aderidos às células foi contado (em 300 células superficiais-CS e 300 intermediárias- CI). A Microscopia eletrônica de varredura (MEV) foi realizada em todas as situações dos ensaios. Leveduras e lactobacilos aderiram fortemente as CEVH, tanto em CS quanto em CI. A coagregação levou a um aumento na capacidade de adesão das leveduras (p < 0,001) e diminuiu a dos lactobacilos (p < 0,001). A adesão dos microrganismos isolados ou co-agregados não apresentou diferença entre CS e CI (p > 0,05). Havendo correlação com o que acontece in vivo, probióticos à base de L. acidophillus e mesmo uma flora lactobacilar vaginal não surtiriam efeito protetor contra a adesão de C. albicans as CEVH e do possível desenvolvimento de candidíase vulvovaginal.

This work has aimed to evaluate the influence of the L. acidophilus and Candida albicans co-aggregation on the adhesion capacity this microorganisms in the human ephitelial vaginal cells (HEVC). One vaginal isolated of C. albicans and one ATCC strain of L. acidophilus was used. A suspension of the isolated and co-aggregated microorganisms was incubated with HVEC obtained from a healthy donor. After one hour, smears were made with crystal violet and Papanicolaou, and the number of yeasts adhered to HVEC was evaluated (300 superficial-SC and 300 intermediate cells-IC). Scanning electron microscopy (SEM) was made in all situations of the assays. Yeasts and lactobacilli adhered strongly to the HEVC, both SC and IC. The co-aggregation there was an increase in the adhesion capacity of the yeasts (p < 0.001) and a diminished adhesion of the lactobacilli (p < 0.001) in SC and IC. The adhesion of isolated and co-aggregated microorganisms was not significantly different between SC and IC (p > 0.05). Supposing that of these findings correlated with the conditions in vivo, the use of probiotics based on L. acidophilus or its presence in the vaginal microbiota would not protect against the adhesion of C. albicans to the HVEC and possible consequent vulvovaginal candidiasis.

Effects of depomedroxyprogesterone acetate on the development and maintenance of Candida albicans in the vagina of oophorectomized Wistar rats (Rattus norvegicus) / Efeitos do acetato de depomedroxyprogesterone sobre o desenvolvimento e manutenção de Candida albicans na vagina de ooforectomizado ratos Wistar ( Rattus norvegicus )

The objective of this study was to determine the effect of medroxyprogesterone acetate (DMPA) on the development and maintenance of Candida albicans in the vagina of oophorectomized Wistar rats. The animals were divided into negative control groups (NCG), which received injections of sterile saline; positive control groups (PCG), which were given injections of estradiol valerate; and progesterone groups (PG), which were given injections of Depo-Provera®. After one week of hormonal induction, vaginal infection by C. albicans was induced in all the groups and detected by vaginal yeast culture and Papanicolaou smear. In addition, scanning and transmission electron microscopy images were obtained to confirm the vaginal infection by yeast in PG. A difference in progesterone levels in PG was observed between the basal level and after hormonal induction (P<0.0001). In this group, 100 percent of the rats acquired vaginal infection in the first week, but did not maintain it until the third week. The pharmaceutical brand of DMPA was effective for inducing the metestrus or diestrus phase of the estrous cycle in rats, similar to the use of pure progesterone. In contrast to estrogen treatment, progesterone alone could not support an experimental vaginal infection by C. albicans for any significant period of time.

O objetivo do presente estudo foi determinar os efeitos do acetato de depomedroxyprogesterona (ADMP) no desenvolvimento e manutenção de Candida albicans na vagina de ratas Wistar ooferectomizadas. Os animais foram divididos em grupos controle negativos (GCN), que receberam injeções de salina estéril; grupos controle positivos (GCP), que receberam injeções de valerato de estradiol; e grupos progesterona (GP), nos quais foram feitas injeções de Depo-Provera®. Após uma semana da aplicação hormonal, foi induzida a infecção vaginal por C. albicans em todos os grupos, detectada por cultura para leveduras vaginais e esfregaço de Papanicolaou. Foram feitas ainda imagens por microscopia eletrônica de varredura e transmissão para confirmar a infecção pela levedura no GP. Foram observados diferentes níveis de progesterona em GP, entre os valores basais e após a indução hormonal (P<0,0001). Neste grupo, 100,0 por cento das ratas contraíram a infecção vaginal na primeira semana, mas não a mantiveram até a terceira semana. A forma farmacêutica de ADMP foi efetiva em induzir as fases de metaestro e diestro do ciclo estral das ratas, da mesma forma que usando progesterona pura. Em contraste com o que ocorre no tratamento com estrógeno, a progesterona não pôde manter a infecção vaginal experimental por C. albicans por um período significativo de tempo.

Candidíase vulvovaginal: fatores predisponentes do hospedeiro e virulência das leveduras / Vulvovaginal candidiasis: susceptibility factors of the host and virulence of the yeasts

INTRODUÇÃO: Leveduras do gênero Candida são patógenos oportunistas freqüentemente isolados das superfícies mucosas de indivíduos normais, mas podem levar ao desenvolvimento de infecções denominadas candidíases, que variam desde lesões superficiais até infecções disseminadas. OBJETIVOS: Ampliar os conhecimentos sobre candidíase vulvovaginal (CVV: infecção de vulva e vagina, causada por leveduras comensais que habitam a mucosa vaginal) e candidíase vulvovaginal recorrente (CVVR: ocorrência de quatro ou mais episódios de CVV no período de 12 meses), bem como caracterizar e abordar o ponto de vista das influências do hospedeiro e dos fatores de virulência dos agentes causais da infecção, principalmente C. albicans, visando identificar a sua importância nessa patologia. Tanto fatores predisponentes locais como sistêmicos do hospedeiro podem contribuir para a invasão por Candida sp. Sua intensa multiplicação no canal vaginal é favorecida por uma série de fatores predisponentes abordados nesta revisão. Também tem sido postulado que existem diferenças na patogenicidade de isolados de Candida sp., não sendo o fungo apenas um participante passivo no processo infeccioso; com isso vários fatores de virulência têm sido propostos e são descritos. DISCUSSÃO E CONCLUSÕES: Este artigo de revisão bibliográfica buscou atualizar os profissionais da área da saúde em relação a CVV, CVVR, aspectos predisponentes do hospedeiro e virulência dos agentes causais, que são pouco conhecidos. Assim, a atualização e o conhecimento de conceitos básicos e clínicos relacionados com essa patologia são muito importantes para auxiliar o seu manejo pelos profissionais da área.

INTRODUCTION: Vulvovaginal candidiasis (VVC) is a vulva and vagina infection caused by comensal yeasts that inhabit the vaginal mucosa and eventually become patogenic, depending on host conditions. Eighty percent to 90 percent of the infections are due to C. albicans, and 10 percent to 20 percent to other species called non-C. albicans (C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis, C. pseudotropicalis, C. lusitaniae). C. glabrata is the second agent in frequency in VVC and yeasts of other genus can also cause this infection, as Saccahromyces cerevisiae, Rhodutorula sp. and Trichosporon sp. Besides host inherent factors, it has been postulated that differences exist in the patogenicity of different isolates of Candida sp. The fungus is not a mere passive participant in the infectious process, and a series of virulence factors has been proposed, but little was investigated in VVC. The objective of this work is to enlarge knowledge on VVC and RVVC, as well as to discuss the influences of host and virulence factors, aiming to identify their importance in this pathology. These aspects are of great importance for professionals that act in the area of women's health.

Lack of association between genotypes and virulence factors in C. albicans strains isolated from vaginal secretion

The physiopathogenesis of vulvovaginal candidiasis (VVC) is still not completely elucidated. The objective of this study was to evaluate if there is a relationship between the different genotypes of Candida albicans, their main agent and the virulence of this yeast in vaginal isolates, and to check if there are laboratorial markers that can predict the ability of each isolate to develop VVC independently of symptoms. The production of exoenzymes protease, phospholipase and haemolysin, resistance to hydrogen peroxide, and the genotype were determined. Genotype A was predominant (75 percent), protease, phospholipase and haemolytic activity were highly expressed, and the majority of the yeasts were sensitive to H2O2 in 1 and 2 hours of exposure, suggesting that these factors are important in the virulence of vaginal isolates. However they did not have any correlation with the genotypes. The different isolates expressed similar virulence potential, suggesting that other factors relating to the yeasts and the host must participate in the development of the clinical disease.

A fisiopatogenia da candidíase vulvovaginal (CVV) não está completamente elucidada até o presente momento. O objetivo deste estudo foi avaliar se exite relação entre os diferentes genótipos de Candida albicans, seu principal agente, e a virulência desta levedura em isolados vaginais, e checar se existem marcadores laboratoriais que possam predizer a habilidade de cada isolado para desenvolver CVV independentemente dos sintomas. Foram determinados a produção de exoenzimas protease, fosfolipase and hemolisina, resistência ao peróxido de hidrogêncio, e genótipo. O genótipo A foi predominante (75 por cento), protease, fosfolipase e atividade hemolítica foram alevadamente expressos, e a maioria das leveduras foram sensíveis ao H2O2 em 1 e 2 horas de exposição, sugerindo que estes fatores são importantes na virulênciae de isolados vaginais. Entretanto, não houve nenhuma correlação com os genótipos. Os diferentes isolados expressaram potencial de virulência similares, sugerindo que outros fatores relacionados às leveduras e ao hospedeiro devem participar no desenvolvimento da doença clínica.

Câncer do colo do útero: tecnologias emergentes no diagnóstico, tratamento e prevenção da doença / Cervical uterine cancer: emerging technologies on the diagnosis, treatment and disease prevention

O câncer do colo uterino é conhecido como uma das causas mais freqüentes de óbito na população feminina em todo omundo: são estimados 500.000 novos casos da doença por ano. Estudos epidemiológicos têm mostrado forte associação entre a infecção pelo papilomavírus humano (HPV), doença viral sexualmente transmissível mais comum, e o câncer de colo uterino. Tipos de HPV debaixo risco (exemplo, 6 e 11) são os agentes causadores das verrugas genitais, enquanto que os tipos de alto risco (exemplo, 16 e 18)estão diretamente ligados ao câncer. Recentes avanços têm levado a um melhor entendimento de como o HPV causa câncer a nívelmolecular e da resposta imunológica ao vírus. Nesta revisão, são discutidos aspectos da infecção com tipos oncogênicos de HPV, novas estratégias de rastreamento utilizando testes moleculares e outros métodos como adjuvantes à citologia, bem como o desenvolvimentode vacinas profiláticas e terapêuticas como uma alternativa na prevenção do carcinoma cervical e suas lesões precursoras.

Worldwilde, the cervical cancer is known as one of the most frequent cause of death in female population: each year, an estimated 500,000 cases are newly diagnosed. Epidemiologic studies have shown strong association of human papillomavirus (HPV) infection, the most common sexually transmitted viral disease, with cervical cancer. Low-risk types of HPV (eg, 6 and 11) are the causative agents of genital warts, whereas high-risk types (eg, 16 and 18) have been connected with cervical cancer. Recent advances have led to a better understanding of how HPV causes cancer on a molecular level and of the immunologic response to HPV. This paper reviews important aspects of infection with oncogenic HPV types, new strategies incorporating molecular testing and other methods as adjunct to cytology, as well as the development of prophylactic and therapeutic vaccines as an alternative for preventing cervical cancer and precursor lesions.

Avaliação do método Papanicolaou para triagem de algumas infecções cérvico-vaginais / Evaluation of the method of Papanicolaou for screening of some cervico-vaginal infections

Tem crescido o interesse na utilização da citologia de Papanicolaou (Pap) para o reconhecimento de infecções cérvicovaginais, como uma importante alternativa diagnóstica. O presente trabalho objetivou avaliar a acurácia diagnóstica da citologia de Pap no Laboratório Oswaldo Cruz de Paranavaí – Paraná, para algumas dessas infecções. Foi realizado um levantamento de dados nos anos de 2003/2004 e foram incluídas as pacientes que tinham resultado de Pap e também de outro exame para o diagnóstico dos seguintes agentes infecciosos: Candida sp, Gardnerella vaginallis, Mobiluncus sp, Leptothrix sp, Papillomavirus humano (HPV) e Trichomonas vaginalis. Para os quatro primeiros agentes, considerou-se também os resultados da bacterioscopia de secreção vaginal (Gram), para HPV os da Captura Híbrida (Digene®) e para T. vaginalis os do exame a fresco de secreção vaginal. Foram incluídos resultados de 1021 pacientes e as infecções mais freqüentes foram candidíase (188 casos, 18,41%) e vaginose bacteriana (142 casos, 13,9%). HPV foi diagnosticado em 14 casos (1,4%), Leptothrix sp em 11 (1,1%) e T. vaginalis em 5 (0,5%). A especificidade de Pap para candidíase e vaginose bacteriana foi de 99,4% e 98,1%, e a sensibilidade de 32,8 % e 56,8 %, respectivamente. Para candidíase, a freqüência de falso positivo (FP) do Pap foi de 13,0%, a de falso negativo (FN) de 7,7 % e a eficiência de 87,5%. Para vaginose bacteriana, FP foi de 5,8%, a FN 19,3% e a eficiência de 93,0%. Em nossa casuística, o método de Pap mostrou-se aplicável para triagem de candidíase e vaginose bacteriana, principalmente para excluir estas patologias, uma vez que os valores de especificidade obtidosforam muito elevados

Avaliação da influência do uso de métodos contraceptivos sobre os resultados dos esfregaços de Papanicolaou / Evaluation of the influence of contraceptive methods on the results of Papanicolaou smears

Foi avaliada a influência do uso de métodos contraceptivos como dispositivo intrauterino (DIU), contraceptivos hormonais (CPH) e preservativo (PRESER), nos resultados dos esfregaços de Papanicolaou (Pap), por meio de análise retrospectiva de seus laudos e das informações sobre métodos contraceptivos de 2251 mulheres, distribuídas em: DIU (n=80), CPH (n=172), PRESER (n=40) e não usuárias (n=1959). As não usuárias apresentaram mais resultados normais e as com DIU mais alterações benignas. Os três grupos de usuárias, principalmente DIU, manifestaram mais metaplasia escamosa do que as não usuárias. Não houve aumento de ASCUS/LIS ou câncer nas usuárias de métodos contraceptivos. Predominaram as infecções candidíase e vaginose bacteriana e em DIU houve mais vaginose. Actinomyces sp. ocorreu apenas em DIU e Trichomonas vaginalis apenas em não usuárias. Assim, é importante a realização de Pap nas usuárias de DIU e CPH para acompanhar as alterações benignas, pois as mesmas podem predispor e/ou facilitar infecções, incluindo por HPV.

This study aimed to evaluate the influence of the use of contraceptive methods, such as the intrauterine device (IDU), the hormonal contraceptive (HCP) and the preservative (PRESER), on the results of Papanicolaou smears (Pap). A retrospective analysis was conducted based on Papanicolau results and on information from 2251 women's contraceptive methods, distributed in: IDU (n=80), HCP (n=172), PRESER (n=40) and non-users (n=1959). Non-users presented more normal results; and IDU users presented benign alterations. Among the three groups, the IDU users manifested more squaly squamous metaplasia than the non-users. There was no notice of ASCUS/SIL or cancer in the users of contraceptive methods. The infections with candidiasis and bacterial vaginosis prevailed. Particularly in IDU users, there was more vaginosis. Actinomyces sp. was only noticed in IDU users, and Trichomonas vaginalis in non-users. Thus, submitting to Pap examination is mainly important for the users of IDU and HCP due to the benign alterations, because these can be predisposed to and/or facilitate infections, including HPV.

Nitrito urinário e infecção do trato urinário por cocos gram-positivos / Urinary nitrite and urinary-tract infection by gram-positive cocci

INTRODUÇÃO: A infecção do trato urinário (ITU) é uma das mais comuns na clínica médica. Os testes que utilizam tiras reagentes detectam significativamente mais infecções por bactérias gram-negativas do que por espécies gram-positivas, uma vez que o teste de nitrito não revela a presença de patógenos gram-positivos em muitos casos. OBJETIVOS: Explorar a microbiologia e a freqüência de infecção urinária por cocos em adultos sintomáticos, relacionando-as com o resultado de nitrito urinário, para traçar o perfil epidemiológico desses pacientes. MATERIAL E MÉTODO: Um estudo retrospectivo foi conduzido na Secretaria de Saúde do município de Maringá-PR, no período de abril de 2004 a março de 2005. RESULTADOS: Amostras de urina de 3.426 pacientes foram coletadas e analisadas. Um total de 448 (13,1 por cento) amostras foi positivo para cultura. Em 388 (86,6 por cento) casos houve crescimento de bacilos gram-negativos (BGN) e em 60 (13,4 por cento) casos, cocos gram-positivos (CGP). A análise estatística de co-morbidades revelou diferença significativa na proporção de pacientes com hipertensão (31,3 por cento com nitrito positivo versus 4,5 por cento com nitrito negativo, p < 0,05). Os pacientes com resultado de nitrito positivo relataram febre em proporção maior que os com nitrito negativo (75 por cento versus 43,2 por cento, respectivamente; p < 0,05). Staphylococcus aureus redutores de nitrato mostraram maior resistência à ciprofloxacina (66,7 por cento) quando em comparação com os isolados não-redutores (100 por cento sensíveis). CONCLUSÕES: Este estudo preliminar mostrou que a avaliação de sinais clínicos e sintomas, juntamente com o resultado de nitrito urinário na tira reagente, poderia auxiliar o médico na tomada de decisões importantes.

BACKGROUND: Urinary tract infection (UTI) is among the most common infections in medical center. Urinalysis tests detect significantly more gram-negative infections than those due to gram-positive bacteria because the urinary nitrite test does not detect the presence of gram-positive pathogens in many cases. OBJECTIVES: Explore the microbiology and frequency of UTI by coccus in symptomatic adult patients, comparing them with urinary nitrite results, in order to delineate the epidemiological profile of these patients. MATERIAL AND METHOD: Retrospective analysis was conducted from April 2004 through March 2005 at Health Center, Maringa, Brazil. RESULTS: Urine specimens from 3,426 patients were collected and examined. A total of 448 (13.1 percent) samples had positive culture results. There were 388 (86.6 percent) strains of gram-negative rods and 60 (13.4 percent) of gram-positive cocci. A statistical analysis of patients' comorbidities revealed a significant difference in the proportion of patients with hypertension (31.3 percent with positive nitrite vs. 4.5 percent with negative nitrite, p < 0.05). The proportion of patients with positive nitrite who had fever was larger than patients with negative nitrite (75 percent vs. 43.2 percent respectively, p < 0.05). Nitrate-reducing Staphylococcus aureus showed high level resistance to ciprofloxacin (66.7 percent) in comparison with nitrite-negative isolates (100 percent sensitive). CONCLUSIONS: This preliminary study had shown that evaluation of clinical signs and symptoms, together with urinary nitrite result, could help physician to take important decisions.

Tricomoníase: aspectos gerais e diagnóstico pela colpocitologia de papanicolaou / Trichomoniasis: general aspects and diagnosis by papanicolaou colpocytology

A tricomoníase, infecção causada pelo parasita Trichomonas vaginalis, é a doença sexualmente transmissível (DST) não viral mais comum no mundo. Existem evidências crescentes de que o parasita seja um importante patógeno, devido à morbidade direta associada a infecção, à sua função na promoção de ruptura prematura de membranas, parto prematuro e recém-natos de baixo peso, bem como por facilitar a transmissão do HIV e de outros agentes de DSTs. O número de mulheres sexualmente ativas que realizam periodicamente seu exame de Papanicolaou (Pap) é altamente significativo e a esta metodologia apresenta um grande potencial para o diagnóstico da tricomoníase, auxiliando no controle dessa infecção. Com isso, as bases morfológicas dessa patologia para o diagnóstico citológico devem ser cuidadosamente revisadas e conhecidas pelos citologistas, com o intuito de serem corretamente aplicadas e não ocorrerem diagnósticos pseudopositivos ou negativos, buscando auxiliar na maximização da eficiência morfológica. Dessa forma, o presente trabalho teve por intuito levantar aspectos gerais do parasita e infestação, bem como descrever de maneira completa os critérios citológicos de diagnóstico da tricomoníase...

Caracterização de leveduras isoladas da vagina e sua associação com candidíase vulvovaginal em duas cidades do sul do Brasil / Characterization of yeasts isolated from the vagina and their association with vulvovaginal candidíasis in two cities of the South of Brazil

OBJETIVOS: avaliar a distribuição de espécies de leveduras isoladas da vagina em duas localidades do sul do Brasil e comparar o perfil de suscetibilidade in vitro destas leveduras a antifúngicos usados na prática clínica. MÉTODOS: todas as mulheres atendidas entre janeiro e junho de 2004 para exames rotineiros de amostras vaginais, independente de serem sintomáticas ou não, foram incluídas neste estudo. Foram excluídas as que apresentavam imunodeficiências como AIDS ou outras infecções genitais. Amostras de conteúdo vaginal dessas mulheres (Jaraguá do Sul - SC (n=130) e Maringá - PR (n=97)) foram cultivadas. As leveduras isoladas foram identificadas e submetidas ao teste de suscetibilidade aos antifúngicos fluconazol, nistatina e anfotericina B. RESULTADOS: a freqüência de cultura positiva para levedura foi semelhante nas duas localidades, aproximadamente 24 por cento. Candida albicans foi a espécie prevalente, mas sua freqüência diferiu: em SC correspondeu a 77,4 por cento das leveduras e foi a mais freqüente tanto nas mulheres sintomáticas quanto nas assintomáticas. Já no PR foi 50,0 por cento, com predomínio mais evidente nos casos sintomáticos. Observamos altos índices de suscetibilidade ao fluconazol e anfotericina B, porém 51,1 por cento das leveduras apresentaram suscetibilidade dependente da dose (S-DD) para nistatina. C. albicans mostrou maior tendência de resistência à nistatina (52,8 por cento de S-DD) do que as espécies não-albicans (44,4 por cento). CONCLUSÕES: nossos dados mostram diferenças regionais quanto à espécie de levedura em amostras vaginais. Sugerem que a determinação da espécie pode ter implicação clínica, considerando as diferenças quanto à suscetibilidade, principalmente à nistatina, e que poderiam ter importância no manejo da candidíase vulvovaginal

Importância da aplicaçäo de critérios morfológicos näo-clássicos para o diagnóstico citológico de papilomavírus humano / Application of non-classical morphological criteria in the cytological diagnosis of human papillomavirus

Existe atualmente grande preocupaçäo com a melhoria no diagnóstico citológico de HPV através da introduçäo de critérios näo-clássicos para o seu diagnóstico, tendo em vista a elevada freqüência da infecçäo viral, bem como o seu potencial carcinogênico. O presente trabalho objetivou uma releitura de 65 casos positivos para HPV por captura híbrida (cujos critérios inicialmente utilizados foram apenas os clássicos), e a introduçäo dos critérios näo-clássicos. Os critérios citológicos mais observados foram os näo-clássicos, sendo bi ou multinucleaçäo o mais freqüente, com n = 39 (60 por cento), seguido de halo perinuclear, com n = 37 (56,9 por cento) e disceratose leve e núcleo hipercromático, ambos com n = 32 (49,2 por cento). Para NIC I predominou a disceratose, com n = 20 (100 por cento); para inflamaçäo, disceratose leve, com n = 35 (87,5 por cento) e para Ascus e Agus, halo perinuclear, núcleo hipercromático, células gigantes e bi ou multinucleaçäo, todos com n = 4 (100 por cento). Todos os 20 casos de NIC I, dez dos 40 casos de inflamaçäo e todos os casos de Ascus (n = 1) e Agus (n = 3) foram considerados positivos para HPV com a utilizaçäo de critérios näo-clássicos, passando a 52,3 por cento dos casos positivos pela captura híbrida a apresentarem a infecçäo viral pela citologia, em detrimento de 23,1 por cento só com os critérios clássicos. Um número razoável de amostras diagnosticadas inicialmente como inflamatórias passaram a apresentar a infecçäo viral, podendo representar a variedade subclínica do vírus, para a qual o diagnóstico molecular apresentou-se como melhor metodologia. A utilizaçäo de critérios näo-clássicos de HPV pela citologia parece muito importante para maximizar a eficiência diagnóstica

Importância da aplicação de critérios morfológicos não-clássicos para o diagnóstico citopatológico de papillomavirus humano (HPV) previamente detectado por PCR / The application and its importance in non-classic morphologic approaches to cytopathology diagnostic of human papillomavirus (HPV) previously detected for PCR

Existe atualmente grande preocupação com a melhoria no diagnóstico citopatológico para HPV e para isto tem-se estudado a introdução de critérios morfológicos não-clássicos, tendo em vista a elevada freqüência desta infecção viral bem como o seu potencial carcinogênico. Desta forma, este trabalho objetivou uma releitura de 41 casos positivos para HPV por PCR, cujos critérios inicialmente utilizados foram apenas os clássicos, e introduzir os critérios não clássicos. Os critérios citopatológicos mais observados foram os não clássicos, sendo bi ou multinucleação o mais freqüente, com n=37 (90,24 porcento), seguido de núcleo hipercromático, com n=35 (85,36 porcento) e núcleo em borrão, com n=24 (58,54 porcento). Quanto aos critérios clássicos, a disqueratose foi observada em n=17 casos (41,46 porcento) e a coilocitose n=10 (24,35 porcento), representando o 4º e o 9º critérios em ordem numérica de observação. Foi evidenciado também que quanto mais avançada a lesão diagnosticada pela citopatologia, menor a freqüência de critérios clássicos e maior a de não clássicos. Após a inclusão dos critérios não clássicos, o diagnóstico de HPV elevou-se de 24,39 porcento dos casos para 75,61 porcento, sendo que 40,0 porcento dos ASCUS e 100,0 porcento dos NIC I, NICII, NIC III e cânceres cervicais passaram a ser positivos para o vírus. Este é um fato de suma importância no aprimoramento dos serviços citopatológicos de rastreamento do câncer cervical. Porém, o único caso normal, os dois inflamatórios, os 4 de metaplasia escamosa e três dos 5 casos de ASCUS permaneceram negativos para HPV, representando exames citopatológicos falso negativos. Este fato é bastante preocupante, uma vez que pacientes portadoras deste vírus, independente do estado clínico, possuem maoir probabilidade de desenvolver lesões precursoras e até mesmo cânceres cervicais.

Estudo das inflamações e infecções cérvico-vaginais diagnosticadas pela citologia / Study of the cervico-vaginal inflammations and infections diagnosed by cytology

A citologia de Papanicolaou tem papel importante no reconhecimento das lesões inflamatórias do sistema genital feminino. Ela permite avaliar a intensidade da reação inflamatória, acompanhar sua evoluçãoe, em certos casos, determinar o agente causal. Desta forma, este trabalho objetivou determinar a frequência de inflamações inespecíficas e infecciosas, bem como dos agentes etiológicos peresentes nos exames citológicos analisados. foi realizado um levantamento dos resultados de exames de Colpocitologia Oncótica realizados no período de 01 de julho de 1998 a 31 de julho de 1999 pelo Labaratório de Análises Clínicas São Camilo de Maringá-PR. Foram realizados 12.014 exames colpocitológicos, dos quais, 8.219 (68,41 por cento) foram casos infalmatórios, sendo 6.986 (58,15 por cento) inflamatórios inespecíficos e 1.233 (10,26 por cento) infecciosos. Candida sp foi o agente mais frequentemente encontrado, representando 61,31 por cento dos casos infecciosos e 6,30 por cento do total de exames analisados; em seguida observou-se: Gardnerella vaginalis (30,17 por cento e 3,06 por cento), Mobiluncus sp (3,65 por cento e 0,37 por cento), Leptothrix vaginalis (2,75 por cento e 0,28 por cento), Trichomonas vaginalis (1,70 por cento e 0,18 por cento), Herpex virus (0,50 por cento e 0,04 por cento) e Chlamydia sp (0,32 por cento e 0,03 por cento). A frequencia de inflamacoes em geral no Laboratório São Camilo foi superior à citada pela literatura. A detecção citológica de Candida sp, Gardnerella vaginalis e Leptothrix vaginalis foi bastante satisfatória, sendo semelhante ao citado por outros autores. Para Mobiluncus sp e Trichomonas vaginalis a freqüência diagnóstica foi inferior a da literatura. O diagnóstico citológico de Chlamydia sp mostrou-se deficiente. O presente trabalho deve ser continuado para realizar estudos comparativos entre a citologia e outros métodos diagnósticos para microrganismos infecciosos cérvico-vaginais.

Avaliação dos critérios morfológicos clássicos e não clássicos de Hpv no diagnóstico colpocitológico / Evaluation of the Hpv classicals and not classicals morphologycal criterions in the colpocytologycal diagnosis

As infecções por HPV provocam alterações citológicas detectáveis nos raspados cérvico-vaginais. Os critérios morfológicos clássicos são coilocitose e disqueratose. Vários autores reforçaram a aplicação dos novos critérios para identificação citológica do HPV. Este trabalho objetivou determinar a freqüência de critérios clássicos e não clássicos através do levantamento dos exames de Colpocitologia Oncótica do período de 01/01/94 a 30/06/98 realizado no LEPAC/DAC/UEM . Do total de 5.172 esfregaços, foi detectado 4,02 por cento (208) casos suspeitos e conclusivos para HPV. Desses, 2,74 por cento apresentaram critérios clássicos e 1,28 por cento critérios não clássicos. Dos 183 esfregaços com NIC I, 133 (72,68 por cento) apresentaram critérios clássicos e 50 (27,32 por cento) critérios não clássicos; dos 12 com NIC II, 07 (58,33 por cento) apresentaram critérios clássicos e 04 (41,67 por cento) critérios não clássicos; dos 05 com NIC III, em 01 (20,00 por cento) foi evidenciado critérios clássicos e em 04 (80,00 por cento) critérios não clássicos. Houveram 08 casos com carcinoma, e 01 (12,50 por cento) apresentou critérios clássicos e em 07 (87,50 por cento) critérios não clássicos. Aplicando quatro ou mais critérios não clássicos, a detecção do HPV melhora sensivelmente. Esse fato é de importância para o diagnóstico desta infecção, desde que está epidemiologicamente comprovada a associação entre a carcinogênese cervical e este vírus. Vários autores relatam que quanto mais progride a lesão, o genoma viral integra-se ao genoma da célula hospedeira, implicando em expressão citopática menos evidente. Sendo assim, as alterações morfológicas clássicas causadas pelo vírus evidenciam-se, predominantemente, em lesões menos graves

Aplicação do método PCR-RFLP para tipagem de HPV em infecções cervicais de pacientes atendidas no Lepac, Universidade Estadual de Maringá / Application of the method of PCR-RFLP to the knowledge of HPV types in cervical infections from patients assisted in Lepac, State University of Maringá (UEM)

O método da Reação em Cadeia da Polimerase, associado com o Polimorfismo de Fragmentos de DNA obtidos por Enzimas de Restrição (PCR-RFLP) foi, aplicado em 20 amostras clínicas cervicais de pacientes portadoras de anormalidades colpocitológicas atendidas no Lepac, Universidade Estadual de Maringá (UEM). O DNA e o tipo de HPV foram detectados e determinados em todas as amostras analisadas. A grande maioria das amostras cervicais era portadora de tipos de HPV com alto potencial para o desenvolvimento neoplásico. O método PCR-RFLP demonstrou grande poder discriminatório, pois foi capaz de detectar o DNA e determinar o potencial para o desenvolvimento neoplásico de até quatro tipos de HPV presentes de forma concomitante em uma única amostra cervical. Os resultados obtidos demonstraram que esse método pode ser utilizado rotineiramente com alta sensibilidade e reprodutibilidade, sendo um método de escolha na triagem primária de pacientes com risco de desenvolver neoplasias cervicais, contribuindo com informações que auxiliem num possível controle dessa doença

Detecção da tricomoníase através da colpocitologia de rotina / Detection of trichomoniasis through routine colpocytology

Trichomonas vaginalis causa doença sintomática ou assintomática no sistema genital feminino e masculino, sendo a detecção de tal infestação bastante sensível por meio da colpocitologia de Papanicolaou. Desta forma, este trabalho teve por objetivo avaliar através de exames colpocitológicos de rotina a freqüência de tricomoníase, as faixas etárias de maior prevalência, a freqüência de queixas de corrimentos vaginais e prurido vulvar, a flora bacteriana associada, e a intensidade das alterações celulares inflamatórias e da reação leucocitária. Foram analisadas 6129 amostras colpocitológicas coletadas de pacientes com idade entre 15 e 75 anos atendidas pelo setor de Citologia Clínica do Laboratório de Ensino e Pesquisa em Análises Clínicas (LEPAC) da Universidade Estadual de Maringá. Do total de amostras analisadas, 2,2 por cento (n=135) apresentaram infestação por tricomonas e a faixa etária mais acometida foi a de 26-30 anos. Das pacientes infectadas, 74 por cento queixaram-se de corrimento vaginal e 40,7 por cento de prurido vulvar. A intensidade da reação leucocitária mais incidente foi a acentuada em 74,3 por cento das amostras, o mesmo para as alterações celulares inflamatórias, cuja intensidade acentuada representou 59,3 por cento . A determinação da incidência de tricomoníase feminina e das faixas etárias mais acometidas é de extrema importância como base para a realização de futuros programas de saúde para controle desta parasitose. Com a determinação da freqüência de queixas de corrimento vaginal e prurido vulvar, das intensidades da reação leucocitária e das alterações celulares inflamatórias, bem como do tipo de flora bacteriana associada, ficou evidente que tais critérios são de grande relevância para a correta diagnose